TBL 030 Оксидазные диски

TBL 030 Оксидазные диски

Состав (Каждая упаковка содержит 50 дисков)

Каждый диск содержит сбалансированные концентрации N, N, N ‘, N’-тетраметил-1,4-фенилендиамина дигидрохлорид.

Инструкции по использованию

Возьмите стерильную петлю из платиновой проволоки (НЕ ИСПОЛЬЗОВАТЬ нихром проводную петлю) или пластиковую петлю или стеклянную палочку или зубочистку. Выберите хорошо изолированные колонии из тестируемой чашки культуры (желательно использовать свежие

культуры, так как старшие колонии могут привести к ненадежным / переменным результатам). Выберите колонию, нежно намазать на диск и наблюдать за развитием глубокого пурпурного цвета в течение 10 секунд, при 25-30 ° C.

Микроорганизмы оксидаза положительные, когда цвет меняется на темно-фиолетовый цвет в пределах от 5 до 10 секунд.

Микроорганизмы замедленно оксидаза положительные, когда цвет меняется на фиолетовый в пределах от 60 до 90 секунд.

Микроорганизмы оксидаза отрицательные, если цвет не меняется, или это занимает больше времени, чем за 2 минуты.

Принцип действия:

Этот тест зависит от глубокого развития фиолетово-синего цвета на оксидазном диске путем окисления бесцветного красителя (N, N, N ‘, N’-тетраметил-1,4-фенилендиамин-дигидрохлорид) из-за активности фермента оксидазы. Гордон и Маклеода (Gordon and McLeod) ввели тест на оксидазу для идентификации гонококков, основанную на способности определенных бактерий получения индофенольного синего в результате окисления N, N-диметил-п-фенилендиамина. Использование более чувствительных и менее токсичных тетраметиловых соединений выступают Эллингворт (Ellingworth), Маклеод и Гордон (McLeod and Gordon). Ковач (Kovac’s) ввел использование дисков, пропитанных раствором N, N, N ‘, N’-тетраметил-1,4-фенилендиамина дигидрохлорида.

Некоторые бактериальные штаммы имеют фермент цитохромоксидазу (индофенол оксидаза), железосодержащий гемапротеин, который катализирует перенос электронов от доноров соединений (NADH) к акцепторами электронов (обычно кислород). В этом тесте, бесцветный краситель (N, N, N ‘, N’-тетраметил-1,4-фенилендиамин-дигидрохлорид) действует как искусственный акцептор электронов для фермента оксидазы. По мере того как краситель окисляется, он образует индофеноле синий, глубокий пурпурно-синего цвета соединения. Этот тест полезен в начальной характеристике аэробных грамотрицательных бактерий из родов Aeromonas, Plesiomonas, Pseudomonas, Campylobacter и Pasteurella.

Микробиологические параметры

Культуральные реакции в течении 10 сек при 25-30 ᵒ С, после применения оксидазного диска.

Меры предосторожности

1. Не использовать проволочные петли из нержавеющей стали или нихрома для инокуляции, так как может произойти ложная положительная реакция за счет поверхностного окисления продуктов этих петель, образовавшихся при сжигании (стерилизации огнем).
2. Предпочтительно использовать свежие культуры, использование взрослых колоний может привести к ненадежным / переменным результатам.
3. Колонии с красителями / нитратами, содержащие носители не подходят для тестирования.
4. Среда, содержащая высокую концентрацию крови, может давать ложные положительные результаты.
5. Организмы, способные производить кислоты, например, Vibrio, Aeromonas и Plesimonas. Организмы должны быть пересеяны на МакКонки Агар , поскольку оксидазная активность может быть подавлена кислотой, что приведет ложной негативной реакции.

Место хранения

Гигроскописен по своей природе, хранить в сухом месте, в плотно закрытой таре при температуре 2 – 8 ° C. Защищать от прямых солнечных лучей.

Ссылки для справок:

1. Gordon, J. and McLeod, J.W. 1928. J. Pathol. Bacteriol. 31: 185–190.
2. Kovacs, N. 1956. Nature (London). 178: 703.
3. Gaby, W.L. and Hadley, C. 1957. J. Bacteriol. 74: 356–358.
4. Gaby, W.L. and Free, L. 1958. J. Bateriol. 76: 442–444.
5. Steel, K.J. 1961. J. Gen. Microbiol. 25: 297–306.