TK 004 набор окраски по граму

TK 004 набор окраски по граму

ПРОЦЕДУРЫ

• Подготовьте мазок на чистой и сухой стеклянной пластине.
• Дайте ему высохнуть на воздухе и зафиксируйте мазок проводя пластинку над пламенем.
• Покройте мазок раствором кристаллического фиолетового (TBL 025) в течение 1 минуты.
• Избавьтесь от пятна кристаллического фиолетового и покрывают мазок раствором йода Грама (SBL 034) в течение 1 минуты.
• Покройте мазок обесцвечивателем (SBL 032) в течение 15-30 секунд.
• Промыть водопроводной водой.
• Покройте мазок с сафранином (краска для подсчета) (SBL 026) в течение 30-40 секунд.
• Промыть мазок водопроводной водой и сушить на воздухе.
• После чего исследовать под иммерсионным объективом (100X).

МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ НАБЛЮДЕНИЕ:

Грамположительных бактерий противостоят обесцвечиванию и пятна фиолетового цвета.

Грамотрицательные бактерии обесцвечиваются и пятна красно-розового с пятнами для подсчета.

ПРИНЦИПЫ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ

Окраска по Граму используется для разделения основные виды бактерий в две большие группы: те, которые впитывают основную краску; кристаллический / метил-фиолетовый (грамположительные) и те, которые позволяют кристаллическому / метиловому фиолетовому  промываться с обесцвечивателем (спирт / ацетон) (грамотрицательные).

Грамположительные бактерий противостоят обесцвечиванию и остаются окрашенными в фиолетовый цвет, при этом грамотрицательные бактерии обесцвечиваются. Затем их окрашивают краской для подсчета сафранином / разбавленным карболовым фуксином. Грамотрицательные окрашиваются в красно-розовый цвет.

ВАРИАЦИИ ОКРАШИВАНИЯ ПО ГРАМУ

Некоторые грамположительные микроорганизмы теряют грам-позитивность из-за повреждения клеточной стенки, чрезмерной термической фиксации или после того, как проведена терапия антибиотиками. Переобесцвечивание мазка. Очень старые или очень молодые культуры грамположительных выступают как грамотрицательные. Иногда грамотрицательные не должным образом обесцвечиваются или если мазок слишком толстый.