TM 324 Забуференный глюкозный бульон
Состав
Ингридиенты | Грамм/л |
Забуференный пептон | 7,00 |
Глюкоза | 5,00 |
Гидрофосфат калия | 5,00 |
Конечное значение рН (при 25ᵒС ) | 6,9±0,2 |
Дистиллированная вода | 1л |
* Обезвоженный порошок, гигроскопичен, хранить в сухом месте, в плотно закрытой таре при температуре ниже 25 ° C и защищать от прямых солнечных лучей.
Инструкции по использованию
Растворить 17 г продукта в 1000 мл дистиллированной воды. Осторожно нагреть до кипения и растворить среду полностью. Разлить по 10 мл в тестируемые пробирки и автоклавировать при 1,1 атм (121 ° С) в течение 15 минут. Охладить до комнатной температуры перед тем как использовать.
Внешний вид: Светло желтого цвета, прозрачный.
рН (при 25 ° С): 6,9 ± 0,2
Принцип действия:
ЗАБУФЕРЕННЫЙ ГЛЮКОЗНЫЙ БУЛЬОН (ЗГБ)используется для дифференциации бактерий семейства Colon-aerogenes, которых можно разделить на две группы, основываясь на их отношение на пептонную и глюкозную среду. Испытания Фогеса Проскауэра и метилового красного появляются в схеме идентификации для энтеробактерий, важных изолятов в клинической микробиологии и тестирования пищевой и молочной микробиологии. ЗГБ также известен как Бульон Фогес-Проскауэр с метиловым красным. Панкреатический гидролизат казеина и пептический перевар животной ткани является источником углерода, азота в ЗГБ. Глюкоза является ферментируемым углеводом. Кислый фосфат калия – буферный агент.
При испытаниях с индикатором рН метиловым красным, группа “coli” образует высокую кислотность, в то время как группа “aerogenes” производит менее кислую реакцию. Тест для обнаружения высоко кислотных метаболитов известен как тест метилового красного (Methyl Red). Реакция цвета происходит при определенных культурах, инкубированных в среде, содержащей пептон и глюкозу, обрабатывают гидроокисью калия и выдержке на воздухе.
Приготовленный бульон ясно и светло-желтого цвета. Приготовление раствора индикатора метилового красного: Растворите 0.04 г метилового красного в 60мл абсолютном этаноле; довести рН до значения 5,0. Раствор становится оранжевого цвета. Приготовление реагента О’Мира (O’Meara) : Растворить 40 г гидроксида калия в 100 мл дистиллированной воды. Дайте остыть, добавьте 0,3 г креатин (моногидрата) и растворить. Приготовленный раствор реагента можно хранить в течение 4 недель в холодильнике ( при + 4 ° С).
Приготовление раствора сульфата меди по Лейфсону (LEIFSON): Растворить 1 г сульфата меди в 40 мл концентрированного аммиака и добавляют 690 мл из 10% -ного раствора гидроксида калия (полученного из гидроксида калия). Приготовление реагента Баррита (Barritt): Растворить 5 г нафтола в 100 мл абсолютного этанола.
Процедура проверки
Инокулировать ЗГБ культурой выросшей из одной колонии. Инкубируют при 35 – 37 ° С в течение 48 часов. Продолжить тестом с метиловым красным и Фогеса-Проскауэра.
Тест с метиловым красным
Перенести 2 мл культуры ЗГБ в пробирку (13 х 100 мм). Добавьте 5-10 капель метилового красного и наблюдать за изменением цвета.
Тест Фогеса – Проскауэра
Перенести 5 мл культуры ЗГБ в пробирку (13 х 100 мм). Добавить 3 мл реагента Фогеса-Проскауэра (5% α-нафтол). Добавьте 1 мл Фогеса-Проскауэра Реагент В (40% КОН). Аккуратно перемешать пробирку и оставить на 2 – 5 минут. Обратите внимание на изменение цвета.
Примечание: Если тест отрицательный продолжайте инкубировать бульон без добавления реагентов, повторите тест после, дополнительных 18 – 24 часов инкубации.
Микробиологические показатели
Тест стимулирования роста
Культуральные свойства, наблюдаемые после инокуляции (103 КОЕ / мл) и инкубации при температуре 35°С в течение 48 часов.
Микроорганизмы | Код американского банка типовых культур | Рост | Результаты тестов | |
Тест с Метиловым красным | Тест Фогеса-Проскауэра | |||
Escherichia coli | 25922 | Обильный | + (Красный) | – (Без изменений) |
Klebsiella pneumoniae | 23357 | Обильный | – (Желтый) | + (Красный) |
Отзывы
Отзывов пока нет.