TM 371 среда Левина

TM 371 среда Левина

Состав

* Обезвоженный порошок, хранить в сухом месте, в плотно закрытой таре при температуре 24 ° С и защищать от прямого попадания солнечных лучей.

Инструкции по использованию

Растворить 37,46 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Осторожно нагреть до кипения с легким перемешиванием и растворить среду полностью. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121ᵒC) в течение 15 минут. Смесь охлаждают до 45 – 50 ° С и тщательно перемешивают среду для того, чтобы окислить метиленовый синий (т.е. восстановить его синий цвет) и прекратить выпадение в осадок, который является неотъемлемой частью среды.

Предосторожность: Храните среду в защищенном от света, чтобы избежать фотоокисления.

Внешний вид: красно – фиолетовый цвет, опалесцирующий гель

рН (при 25 ° С): 7,1 ± 0,2

Принцип действия

АГАР С ЭОЗИНОМ И МЕТИЛЕНОВЫМ ГОЛУБЫМ ЛЕВАЙНА используется для выделения, подсчета и дифференциации членов Enterobacteriaceae. Агар с эозином и метиленовым голубым был разработан Холт-Харрисом (Holt – Harris) и Тигом (Teague). Эта формула содержит лактозу и сахарозу с двумя индикаторными красителями, эозина Y и метиленовым синим. Левайн изменил формулу путем удаления сахарозы и удвоение концентрации лактозы. Агар с эозином и метиленовым голубым Левайна используется для дифференциации кишечной палочки и Enterobacter aerogenes , а также для быстрой идентификации Candida Albicans. Эта среда рекомендуется для выявления, подсчета и дифференциации членов колиформной группы. Уэлд (Weld) предложил использовать агар с эозином и метиленовым голубым Левайна, с добавлением хлортетрациклина гидрохлорида, для быстрой идентификации Candida Albicans в клинических образцах.

Эозин Y и метиленовый синий делают среду слегка избирательной и подавляют некоторые грамположительные бактерии. Эти красители служат в качестве дифференциальных показателей в ответ на ферментацию углеводов. Это помогает дифференцировать ферментеров лактозы от неферментирующих организмов в агаре с эозином и метиленовым голубым Левайна. Отношение эозин – метиленовый синий доводят до примерно 6: 1. Колиформные бактерии производят багрянистые черные колонии благодаря поглощению метиленового сине-эозинового комплекса красителя, при понижении рН. Комплекс краситель всасывается в колонию.

Неферментирующие вероятно повышают рН окружающей среды путем окислительной де-аминирования белка, который растворяет метиленовый синий-эозин комплекс, что приводит к образованию бесцветных колоний. Некоторые штаммы видов Salmonella и Shigella не растут в присутствии эозина и метиленового синего.

Лактоза служит в качестве источника энергии, будучи ферментируемым углеводом. Гидролизат животной ткани служит в качестве источника углерода, азота и других необходимых питательных веществ для роста. Эозин-Y и метиленовый синий служат в качестве дифференциальных показателей. Однако для получения изолированных колоний стандартные процедуры следует использовать. Подтверждающие тесты должны быть дополнительно проведены для идентификации изолированных колоний.

Интерпретация результатов

Культурные характеристики, наблюдаемые после инокуляции (10³ КОЕ / мл) и инкубации при температуре 35 ± 2 ° С в течение 18 – 24 часов.